登錄
葛根中黃酮類化合物的測定高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
一、 適用范圍
范圍本文件規(guī)定了葛根中黃酮類化合物的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜的定量檢測方法.本文件適用于野葛和粉葛中葛根素、３'-羥基葛根素、３'-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元、染料木素、染料木苷、刺芒柄花苷、刺芒柄花黃素、異甘草素和鷹嘴豆芽素A等１１種黃酮類化合物含量的測定.
二、 規(guī)范性引用文件
規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款.其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件.GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法.
三、 術(shù)語和定義
本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義
四、 原理
葛根樣品中的黃酮類化合物用乙醇水溶液超聲提取,采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀測定,外標法定量.
五、試劑
非另有規(guī)定,所有試劑均為分析純.
５.１試劑
５.１.１ 水:GB/T6682,一級.
５.１.２甲醇(CH４O):色譜純.
５.１.３ 甲酸(CH2O2):色譜純.
５.１.４ 乙醇(C２H６O):分析純.
５.２試劑配制
５.２.１ 10％甲醇溶液:取10mL甲醇(５.１.２),加水(５.１.１)定容至100mL,混勻.
５.２.2 30％乙醇溶液:取30mL乙醇(５.１.４),加水(５.１.１)定容至100mL,混勻.
５.３ 標準黃酮類化合物標準品:相關(guān)信息見表１,純度不低于98％.
５.４ 標準溶液配制
５４.１ 黃酮類化合物標準儲備液:準確稱取11種(表１)待測物質(zhì)的標準品,用甲醇(５.１.２)溶解后,加入10％甲醇溶液(５.２.１)定量稀釋,制成高濃度單標準品儲備液.分別移取一定量的11種單標準品儲備液于25mL容量瓶,10％甲醇溶液(５.２.１)定容,制成１０mg/L的母液作為標準品儲備液.避光-18°C以下保存,備用.
５.４.２ 黃酮類化合物混合標準溶液:用10％甲醇溶液(５.２.１)對10mg/L的母液(５.４.１)稀釋配成不同濃度的混合標準溶液用于繪制標準曲線.混合標準溶液應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)配.
表１黃酮類化合物標準品基本信息表
六、儀器設(shè)備
６.１超高效液相色譜Ｇ串聯(lián)質(zhì)譜儀:配有電噴霧離子源(ESI).
６.２電熱鼓風干燥箱:溫度50°C~330°C,功率3.1kW.
６.３超聲波清洗器:超聲輸入功率200W.
６.４離心機:轉(zhuǎn)速不低于7500r/min.
６.５超細水冷式粉碎機:細度20目~180目(0.85mm~0.09mm),功率2.5kW.
６.６天平:感量0.001g和0.0001g.
七、試樣制備
７.１試樣制備新鮮葛根經(jīng)清洗去掉泥沙、去皮,用切片機切成２mm薄片后,放置于托盤中,于70°C烘箱中烘干至恒重.然后用分級超細水冷式粉碎機將葛根樣品粉碎,全部裝入潔凈的容器中,立即檢測.如果需要較長時間保存,將樣品密封、標記后于－18°C以下保存.
７?２試樣提取稱取葛根粉末0.5g(精確至0.0001g),置于50mL離心管中,加入25mL30％乙醇溶液(5.2.2),室溫下超聲提取45min.于7500r/min離心５min,將上清液轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中.沉淀物再用30％乙醇溶液(5.2.2)洗滌２次,每次用量約５mL.在相同條件下離心５min,合并上清液,30％乙醇溶液(5.2.2)定容至50mL.上樣前,采用0.22μm有機相濾膜過濾(5.5).
如果您需要購買 標準物質(zhì) | 標準溶液 | 質(zhì)控樣 等實驗室用品記得找我喲！風里雨里璽標在等你?。ü倬W(wǎng)：m.dajianbanyun.cn）
部分素材來于網(wǎng)絡(luò)，如有侵權(quán)，請聯(lián)系刪除。
2238774038