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      漿果類水果中花青苷的測(cè)定 高效液相色譜法

      發(fā)布時(shí)間:2023-06-20 09:57:04

       

       

       

       

       


      1、 范圍

       

      本文件規(guī)定了漿果類水果中花青苷測(cè)定的高效液相色譜法


      本文件適用于漿果類水果中16種花青苷(附錄A)的測(cè)定,


      本文件測(cè)定的16種花青苷中,矮牽牛索-3-0-葡萄糖苷和芍藥索-3-O-葡萄糖苷的線性范圍為0.5mg/L~50mg/L,其余14種花青苷的線性范圍為0.5mg/L~100mg/L;以試樣稱樣量為1g.定容體積為50mL計(jì),16種花青苷的檢出限和定量限詳見附錄A。

       


      2、 規(guī)范性引用文件


      下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款,其中,注日期的引用文件,僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件

       

      GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

       

       

      3、 定義和術(shù)語

       

      本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

       

       

      4、 原理

       

      漿果類水果中的花青苷經(jīng)鹽酸甲醇溶液振蕩提取,經(jīng)反相色譜柱分離,紫外一可見光檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè),以保留時(shí)間定性,外標(biāo)法定量。

       


      5、試劑和材料

       

      5.1  除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純:水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水,


      5.2  甲醇(CH,OH).


      5.3  甲酸(HCOOH):色譜純


      5.4 鹽酸(HC):36%~38%,


      5.5  乙腈(CH,CN):色譜純


      5.6  鹽酸甲醇溶液:6mL鹽酸(5.4)和194mL甲醇(5.2)混勻,


      5.7  提取劑:50mL鹽酸甲醇溶液(5.6)和450mL甲醇(5.2)混勻.


      5.8  流動(dòng)相A:50mL甲酸(5.3),用超純水定容至1000mL,


      5.9  流動(dòng)相B:1000mL乙腈(5.5)


      5.10  標(biāo)準(zhǔn)品:純度≥95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),相關(guān)信息見附錄A


      5.11 單標(biāo)儲(chǔ)備溶液:準(zhǔn)確稱取5.0mg.用提取劑(5.7)溶解并定容至5mL:即為1000mg/L的單標(biāo)儲(chǔ)備液,于一18儲(chǔ)存于密閉棕色玻璃瓶中,有效期6個(gè)月。


      5.12  混合標(biāo)準(zhǔn)工作液:將單標(biāo)儲(chǔ)備溶液混合后.用提取劑(5.7)作為溶劑,逐級(jí)稀釋成0.5mg/L。


      5.12  微孔濾膜:0.45μm:有機(jī)相:

       

       

      6、儀器和設(shè)備

       

      6.1  高效液相色譜儀:配有紫外-可見光檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。


      6.2  分析天平:感量為0.01g和0.0001g:


      6.3  搖床:溫度可控:轉(zhuǎn)速200 r/min.


      6.4   離心機(jī):轉(zhuǎn)速不低于5000r/min:


      6.5  冷凍研磨機(jī):轉(zhuǎn)速25 000r/min.

       

       

      7、儀器和設(shè)備

       

      7.1 試樣制備


      果實(shí)洗凈,捩干,取可食部分200g,切碎混勻,用冷凍研磨機(jī)研成粉末。


      7.2 試樣保存


      試樣裝人樣品瓶中,密封,置一80條件下冷凍保存。

       

       

       

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